A menudo la Absorbancia y la Fluorescencia son consideradas tecnicas que compiten
por la cuantificación de Biomoleculas.
Ambas presentan sus propias ventajas y desventajas. De hecho, ambos tipos de pruebas funcionan por igual para la detección del recién nacido.
El screening de los recién nacidos por absorbancia es tan eficáz como el screening por fluorescencia. De hecho, las pruebas colorimétricas tienen todas las ventajas para un cribado neonatal eficaz y rentable.
Estas son las razones por qué:
Suficientemente Sensible
La concentración de biomarcadores en screening neonatal (NBS) equivale a unos pocos microgramos por litro es decir que van de mili a micromolar. Los ensayos de absorbancia (enzimaticos o ELISA) pueden detectar moléculas hasta el nivel nano/picomolar[1] . Aunque menos sensible que la fluorescencia el cribado neonatal por Absorbancia sigue siendo lo suficientemente sensible.
Tecnología sencilla y asequible
El precio de los espectrofotómetros tiende a ser más bajo que el de los fluorímetros [2]. De igual forma, los substratos cromogénicos son más asequibles. Combinado, screeningneonatal por absorbancias parece ser más rentable. Esto es particularmente relevante en un mercado donde el costo por determinación domina.
Además, los espectrofotómetros son instrumentos fáciles de usar [2]:
- Software muy intuitivos.
- El mantenimiento es sencillo ya que tienen pocas partes móviles.
Especificidad mejorada
Asi como en la Fluorescencia , particularmente los sustratos cromogénicos son usados para cuantificar los biomarcadores NBS: sales de tetrazolio para ensayos enzimáticos y TMB para ELISA [3].El tratamiento enzimático conduce a la generación de color.
La lectura de la señal de absorbancia es específica y proporcional al analito de interés..
Baja afectación de las condiciones experimentales
Las condiciones experimentales (por ejemplo, pH, temperatura, turbidéz) influyen tanto en los ensayos de absorbancia como en los de fluorescencia. En consecuencia, los fabricantes toman todas las precauciones necesarias para proporcionar kits de alta calidad: reactivos estandarizados, protocolo bien definidos y gestión de la calidad del producto. Todo esto ayuda a evitar errores de medición en el cribado neonatal por absorbancia o por fluorescencia.
Concretamente, ¿por qué elegir la absorbancia?
ZenTech s.a. ofrece una amplia gamma de kits enzimaticos o ELISA para NBS. Actualmente todos se basan en la medición de absorbancia . La elección de la absorbancia es insteresante ya que :
- Sensibilidad y especificidad mejorada para Cribado Neonatal
- Tecnica asequible y sencilla
- Sin restricciones para ejecutar los ensayos.
Por todo lo anterior, el cribado neonatal por absorbancia ha demostrado estar perfectamente adaptado.
Bibliography
- [1] Acharya, A. P. et al. (2013) ‘A fluorescent peroxidase probe increases the sensitivity of commercial ELISAs by two order of magnitude’, Chem Commun (Camb), 14, 49(88), pp. 10379–81.
- [2] https://www.biocompare.com/Bench-Tips/173963-Choosing-the-Best-Detection-Method-Absorbance-vs-Fluorescence/
- [3] Gibbs, J., Vessels, M. and Rothenberg, M. (2011). Selecting the Detection System – Colorimetric, Fluorescent, Luminescent Methods for ELISA Assays (Application note No CLS-DD-AN-458), https://www.corning.com/catalog/cls/documents/application-notes/CLS-DD-AN-458.pdf
